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《多种医学分子技术在肝癌临床诊断治疗中的应用研究》

关键词:肝细胞癌 医学分子技术

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文件编号: KEYAN666153563666
下载格式: Word/DOC(PDF已转Word)
中图分类: R735.7
完成/联系人
完成单位: 天津市第三中心医院
科研日期:2010
研究行业:
研究主题: 肝细胞癌,医学分子技术,诊断,

本课题为天津市科委批准立项的重点科技攻关专项《多种医学分子技术在肝癌临床诊断治疗中的应用研究》,研究的目的:利用肝癌及癌周组织、慢性乙型肝炎和肝硬化患者的组织以及血液等各类临床标本,采用多种分子细胞生物学研究技术,为进行肝癌的高危人群筛查与预警、早期诊断、预后判断、免疫细胞治疗和药物筛选提供充足的基因靶点和检测方法,同时为研究肝癌与乙型肝炎、肝硬化之间的相关性提供充足的基因靶点或线索。

主要成果与创新点:(1)初步建立肝癌分子诊断指数(MDI)的研究方法。利用RT-PCR分析16个基因在肝癌等组织中表达,选取GPC3等6个基因优化MDI检测,显示其具有高特异性和高敏感性。(2)通过IL-10和ALDH2两个基因10个SNP位点分析,发现IL-10的-819位点AA基因型频率、ALDH2 rs4646778位点C等位基因和rs671位点GG基因型/G等位基因与肝病关联。(3)利用自行构建的HBV标准品、cccDNA特异性引物和探针以及优化的内切酶与PASD酶消化DNA方法,构建一种特异性优于现有方法的实施荧光定量HBV cccDNA检测方法。(4)建立低分化原发性肝细胞癌细胞系1株,初步确定其起源可能为肝前体细胞或干细胞;利用SNP芯片筛选获得4个高度扩增的CNV区域,发现其中3个候选扩增区域在超过50%的肝癌组织中均呈现扩增趋势,发现CD1d基因在肝癌细胞系与肝癌组织中均呈现上调的趋势并与拷贝数增加相关。(5)建立具有中国的地域特征和乙型肝炎基础的肝癌DNA甲基化谱,多基因甲基化在不同组织中的差异显示肝癌发生中渐进的表观遗传学改变,证实肝脏中区域癌化的存在。(6)利用肝癌病人术中失血等来源单核细胞在体外诱导获得足够数量具有典型形态和表型的成熟DC,用于后续的肝癌DC瘤苗的实验研究;Dexo可诱导显著的淋巴细胞增埴并诱发特异性杀伤效应,在有DC参与的情况下明显增强。(7)建立一系列的分子细胞生物学研究方法,并与肝病的临床诊治密切结合,为进一步深入研究和临床应用提供较好的技术支撑,形成一个医学分子技术研究、开发和临床应用的高端技术平台。

应用前景:依据目前的研究成果,进一步筛选和优化和肝癌密切相关的各类分子指标,通过对多中心、大样本的验证,有希望在肝癌高危人群的早期筛查、分子预警和预后评估等方面提供有意义的分子指标;另一方面,通过初步建立的自体免疫细胞治疗肝癌的临床前治疗研究,尽快通过卫生部规定的第三类医疗技术申请,安全、有效地开展临床细胞治疗工作。通过市科委、市卫生局的课题经费和医院自筹经费的大力支持,使该项目既能深入肝癌的理论研究,同时又能尽早服务于临床与患者,提高我市对肝癌的诊治水平。

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